T/LZZLXH 056-2021 ICS 03.080 A10 团体标准 T/LZZLXH 056-2021 实验室检测用培养基和试剂管理规范 Specification formanagement ofmedia andreagents forlaboratory testing 2021 -01-25发布 2020 -02-26实施 林芝市质量协会 发布 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/LZZLXH 056-2021 前言 本标准按照 GB/T 1.1-2020 给岀的规则进行起草。 本标准由林芝质量协会提岀并归口。 本标准起草单位：西藏自治区产品质量监督检验所、西南政法大学、林芝市质量协会。 本标准主要起草人：辛双阳、次仁卓嘎、龙莎莎、罗笑娟、何天文、邓杏娟、鲜林霏、洛桑卓玛、 买秀兰、赵明、叶国林 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/LZZLXH 056-2021 1实验室检测 用培养基和试剂管理 规范 1范围 本标准提岀实验室检测 用培养基和试剂的管理规范，旨在为微生物实验室提供培养基和试剂管理的 科学路径，以满足相关要求。 本标准包含术语及定义，培养基采购、验收、贮存、制备、使用、弃置等内容。 本标准适用于微生物实验室检测用培养基和试剂的管理，并满足 GB/T 27025《检测和校准实验室能 力的通用要求》（IDT ISO/IEC 17025）、国家认证认可监督管理委员会《检验检测机构资质认定评审准 则》对微生物检测用培养基和试剂的管理要求。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB4789.2食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定 DB51/T 2158实验室服务和供应品采购及管理指南 DB51/T 2166微生物检测领域培养基和试剂的验证 3术语和定义 GB4789.28 界定的以及下列术语和定义适用于本标准。 3.1培养基 culturemedium 液体、半固体或固体形式的、含天然或合成成分，用于保证微生物繁殖（含或不含某类微生物的抑 菌剂）、鉴定或保持其活力的物质。 3.2试剂 reagent 用于微生物检验的染色剂和培养基配套试剂。 3.3商品化即用型培养基 ready-to-use medium 以即用形式或融化后即用形式置于容器（例如平皿、试管或其他容器）内供应的液体、固体或半固 体培养基。 注：商品化即用型培养基可分为以下四种： ——完全可即用培养基； ——需重新融化的培养基（如用于平板倾注技术）；——使用前需重新融化并分装（如倾注到平皿）的培养基； ——使用前需重新融化，添加物质并分装的培养基（如：TSC 培养基和 Baird Parker琼脂）。 3.4商品化脱水合成培养基 culture medium prepared form commercially formulations 使用前需加水和进行处理的干燥培养基。 注1：商品化脱水合成培养基的形态一般为粉末状、小颗粒状、冻干等。 注2：商品化脱水合成培养基一般分为以下两种： ——完全培养基，使用时无需加入任何其他添加剂； 全国团体标准信息平台 T/LZZLXH 056-2021 2——不完全培养基，使用的时候需加入添加剂。 3.5自制培养基 culture medium prepared form components inthelaboratory 使用者（实验室）依据完整配方配制的培养基。 3.6（培养基或试剂）批 batch（culture media orreagent） 特定生产周期内生产的、产品型号和编号相同，经过性能测试、质量满足要求的一批培养基或试剂 的半成品或成品。 3.7培养基及试剂的性能 performance ofculture media 在特定条件下培养基对测试菌株的反应能力。 4采购 应按 DB51/T 2158的要求选择合格供应商，实施培养基与试剂采购。 4.1供应商在供应产品的同时，应向使用者提供生产企业所附相关文件。文件应包含下列内容： a）培养基或试剂的各种成分（含添加成分名称及产品编号）； b）批号； c）最终 pH（适用于培养基）； d）储存信息和有效期； e）标准要求及质量测试报告； f）必要的安全操作提示和（或）可能产生危害的信息。 4.2如果电子文本能确保所提供的文件信息真实有效，供应商可提供电子文本。 4.3供应商应能保证并要求厂商在培养基发生任何配方的改变时，及时告知实验室。 5验收 5.1实验室应逐批验收所采购的培养基和试剂，检查并记录下列内容： a）有无产品合格证明； b）包装是否完好； c）产品生产日期及有效期； d）所附的文件内容是否完整； e）验收日期和验收人的签名。 5.2若上述检查内容岀现不符合项，则应拒收。 6贮存 6.1应严格按供应商明示的贮存条件贮存培养基和试剂，以保证各成分不会发生改变，超过贮存有效期 的培养基和试剂不能再使用； 6.2应有有效保存培养基和试剂的管理记录，记录中应包括以下内容： a）容器密闭性检查结果； b）首次开封日期； c）有效期； d）检查内容物流动性、均匀性、结块情况和色泽的记录。 全国团体标准信息平台 T/LZZLXH 056-2021 37制备 7.1一般要求 7.1.1 应根据培养基和试剂的有效期决定其使用的先后，先到有效期的先用； 7.1.2 制备过程中，应采取措施避免接触性和吸入性危害，尤其应避免接触有毒物质（如胆盐等选择 剂）； 7.1.3 称量前，应检查培养基和试剂的流动性、均匀性、结块情况和色泽变化，若岀现明显改变，则 不应再使用； 7.1.4 称量时，应遵守良好实验室规范和生产厂商提供的使用说明。 注：培养基的不正确制备会导致培养基岀现质量问题（见附录 A）。 7.2商品化脱水合成培养基的使用 7.2.1 应严格按照厂商提供的使用说明， 使用商品化脱水合成培养基制备培养基， 如配制重量 （体积）、 pH值、灭菌条件和操作歩骤等。 7.2.2 做好配制记录。配制记录包含下列相关信息： a）培养基名称和类型、制造商、批号、称重量、配制体积（分装体积）； b）当作为稀释液或因其他原因要对体积进行控制时，应记录灭菌后的体积； c）pH（最初和最终）值； d）无菌措施（包括实施的方式、温度和时间）； e）配制日期、配制人员； f）灭菌措施，包括灭菌方式、设备、时间和温度等。 7.3实验室自制培养基的制备 7.3.1 自制培养基时，应按照配方准确配制； 7.3.2 自制培养基的记录，除 7.2.2规定的内容外，还应包括下列信息： a）培养基表观特性； b）每个成分的名称、级别、含量、制造商、批号。 7.4添加成分的制备 7.4.1 应按产品使用说明书的要求制备添加成分; 7.4.2 不稳定的添加成分应即配即用； 7.4.3 不得使用过期的添加成分； 7.4.4 批量配制的抗生素溶液可分装后冷冻贮存，但解冻后的贮存溶液不能再次冷冻。 7.4.5 应要求供应商或生产商提供冷冻对抗生素活性影响的有关资料，也可由使用者自行测试。 7.4.6 当添加成分中含有有毒物质（尤其是抗生素）时，应小心操作，必要时需在通风橱中操作。 7.5配制用水 7.5.1 除非另有规定，配制用水的电导率在 25℃时不应超过 25us/cm； 7.5.2 应按 GB4789.2规定的方法，采用平板计数琼脂培养基，定期检查配制用水的微生物污染情况, 水中微生物不应超过 103CFU/mL。 全国团体标准信息平台 T/LZZLXH 056-2021 47.5.3 盛装配制用水的容器最好由中性材料制成，如中性玻璃、聚乙烯，在初次使用前应确认不含任 何抑菌因子。 7.6称重和溶解 7.6.1 必要时，称量应在通风柜中，佩戴口罩操作，以防吸入含有有毒物质的培养基粉末； 7.6.2 溶解时，先加入适量的水，充分混合（注意避免培养基结块），然后加水至所需的量后适当加 热，并重复或连续搅拌使其快速分散，必要时应完全溶解； 7.6.3 含琼脂的培养基在加热前应浸泡几分钟。 7.7调整 pH 7.7.1 应使用适合的 pH计，检测培养基灭菌前后的 pH； 注：固体培养基可用带针式探头的固体培养基专用 pH计。 7.7.2 灭菌前后，通过检测发现培养基的 pH不能满足要求时，应按以下要求进行调整： a）灭菌前，一般使用浓度约为 40g/L（约 lmol/L）的氢氧化钠溶液或浓度约为 36.5g/L（约 lmol/L） 的盐酸溶液进行调整； b）灭菌后，使用灭菌或除菌的溶液进行调整。 7.7.3 除特殊情况外，培养基和试剂在灭菌后冷却至 25℃时，pH 应在规定的土 0.2pH范围内。 7.8分装 将配好的培养基分装到适当的容器中，培养基体积不得超过容器体积的 80%。 8灭菌 8.1—般要求 8.1.1 应按照相关标准或供应商使用说明，对培养基和试剂实施灭菌； 8.1.2 灭菌方式通常有湿热灭菌法、过滤除菌法和煮沸等。 注：有些试剂则不需灭菌，可直接使用（参见相关标准或供应商使用说明）。 8.2湿热灭菌 8.2.1 一般情况下，应在高压锅或培养基制备器中进行湿热灭菌； 8.2.2 应按照相关标准或供应商使用说明的规定确定灭菌参数； 8.2.3 单个包装，培养基体积不应超过 1000 mL，否则灭菌时可能会造成过度加热； 8.2.4 加热完成后采用适当的方式冷却，以防加热过度。 注：适当的冷却方式对于大容量和敏感培养基十分重要，例如含有煌