深圳市检验检测认证协会 发 布 ICS 01.110 CCS A 50 团 体 标 准 T/SZTIC 002-2021 保健食品中非法添加化 学药物的快速检测直接 离子化小型质谱法 Direct ionization mini -mass spectrometry for rapid detection of illegal additives in healthy food 2021-09-15发布 2021-09-15实施 全国团体标准信息平台 T/SZTIC 002-2021 I 前 言 本标准参照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本标准由深圳市检验检测认证协会提出并归口。 本标准起草单位：深圳市易瑞生物技术股份有限公司、深圳市至秦仪器有限公司、清华大学深圳国 际研究生院、中国食品药品检定研究院、深圳市药品检验研究院、深圳市通量检测科技有限公司、厦门 海荭兴仪器股份有限公司 、广东启龙集团 有限公司 。 本标准主要起草人：严义勇、霍新明、王炳志、鲁信琼 、宛玉茼、张高飞、孙姗姗、余泉、钱翔、 倪凯、于玥、董喆、王晓炜、曹进、唐飞、王晓浩、唐中令、钟应立、陈和秀、林茂香 、李崇湘。 全国团体标准信息平台 T/SZTIC 002-2021 1 保健食品中非法添加化学药物的快速检测直接离子化小型质谱 法 1 范围 本方法规定了丸剂、片剂、粉剂、 硬胶囊、袋泡茶、 口服液及保健酒等 保健食品中的罗通定、硫代 艾地那非、瑞格列奈、沙丁胺醇、红地那非、阿替洛尔、伪伐地那非、利血平、格列齐特、罗格列酮、 盐酸二氧丙嗪、硝苯地平、西地那非、酚酞、苯乙双胍、文拉法辛、 吡咯列酮、卡托普利、马来 酸氯苯 那敏、西布曲明、那莫西地那非、羟基豪莫西地那非、二甲双胍、格列苯脲、尼群地平、他达拉非、豪 莫西地那非、伐地那非、那红地那非、氨基他达拉非、丁二胍共 31种非法添加化学药物的 快速检测方法 。 本方法适用于保健食品 中31种非法添加化学药物 的快速检测。 2 原理 本方法采用直接离子化小型质谱法。样品经提取后，使用直接离子化小型质谱仪进行检测，采用数 据依赖型数据采集模式进行分析，采集目标离子的一级与二级质谱图，并将测试结果与内置标准谱图库 中的 31种非法添加化学药物的标准质谱图进行匹配计算，对测 试结果进行判定。 3 试剂和材料 3.1 试剂 3.1.1 甲醇，色谱纯。 3.1.2 乙腈，色谱纯。 3.1.3 乙醇，色谱纯 。 3.1.4 提取液：5‰甲酸 -10%乙腈 -乙醇溶液：使用移液器取 500 µ L甲酸（ 3.1.1）、10 mL乙腈（ 3.1.2）， 用乙醇（ 3.1.3）定容至 100 mL。 3.2 标准品 罗通定、硫代艾地那非、瑞格列奈等 31种标准品的中文名称、英文名称、 CAS登录号、分子式、相 对分子质量见 附录 A，纯度均 ≥95%。 注：或等同可溯源物质。 3.3 标准溶液配制 3.3.1 标准储备液（ 1 mg/mL）：精密称取 适量 31种标准品（ 3.2），分别置于 10 mL容量瓶中，用 甲醇（3.1.1）溶解并稀释至刻度，摇匀，分别制成浓度为 1 mg/mL的标准储备液。 -20℃避光保存。 全国团体标准信息平台 T/SZTIC 002-2021 2 3.3.2 标准中间液（ 100 μg/mL）：分别准确吸取 1 mL标准储备溶液 (3.3.1)至10 mL容量瓶中，用 甲 醇（3.1.1）稀释至刻度，摇匀， 分别制成浓度为 100 μg/mL的标准中间液。 3.4 材料 3.4.1 滴瓶。 3.4.2 500 µL EP管。 3.4.3 0.22 µm有机尼龙滤膜。 3.4.4 取样勺。 4 仪器设备 4.1 小型离子阱质谱 仪。 4.2 离子源：自吸式电喷 雾离子源或其他等效电喷雾离子源。 4.3 涡旋振荡仪。 4.4 超声波清洗器。 4.5 电子天平：感量为 0.0001 g。 4.6 移液器：量程 1 µ L、100 µ L和1 mL。 4.7 环境条件：温度 15℃~40℃ ，湿度≤80%。 5 分析步骤 5.1 试样制备 固态试样：丸剂、片剂、粉剂、硬胶囊、袋泡茶， 取代表性样品，混匀磨碎； 液态试样：口服液或保健酒保健品，直接取代表性样品。 备注：片剂如有糖衣需除糖衣；硬胶囊需除胶囊壳。 5.2 试样提取与净化 称取 100 mg样品于滴瓶（ 3.4.1）中，加入 3 mL提取液（ 3.1.4），将滴瓶盖好 拧紧后放在涡旋振 荡仪（ 4.3）震荡 1 min或者大力摇匀 1 min；然后将 0.22 µm有机尼龙滤膜（ 3.4.3）装在滴瓶嘴上，挤 压滴瓶，将提取液过滤至 500 µL EP管（ 3.4.2）中，收集滤液略超过 300 µL，待上机测试 。 5.3 测定步骤 5.3.1 测定步骤 将装有样品提取液的 EP管安放在离子源卡位上，进行质谱分析。 5.3.2 仪器测定条件 电离模式：正离子模式 。 喷雾电压： 5000 V。 质量扫描范围 ：m/z 50-650。 质量扫描速度：不低于每秒 1500质量数。 全国团体标准信息平台 T/SZTIC 002-2021 3 质谱分析方式：数据依赖型串级质谱 分析模式， 31种非法添加 化学药物对应的母离子与子离子参 数见表 1，其余参数参照仪器使用说明书进行设定。 表1 31种非法添加化学药物的小型质谱分析参数 序号 目标物 母离子（m/z） 子离子（m/z） 参考子离子（ m/z） 1 罗通定 356 192、165 192 2 瑞格列奈 453 162、230 162 3 沙丁胺醇 240 148、166 166 4 阿替洛尔 267 190、145、225 225 5 利血平 609 397、448 397 6 罗格列酮 358 135、119 135 7 盐酸二氧丙嗪 317 272、208 272 8 酚酞 319 225 225 9 文拉法辛 278 260、215 260 10 吡咯列酮 357 134、119 134 11 马来酸氯苯那敏 275 230、167 230 12 西布曲明 280 139、125 139 13 硫代艾地那非 505 393、448 393 14 红地那非 467 420、396、353 353 15 伪伐地那非 460 432、377 432 16 格列齐特 324 127、110 127 17 硝苯地平 347 315 315 18 西地那非 475 377、311 377 19 苯乙双胍 206 60、189 60 20 卡托普利 218 116、172 172 21 那莫西地那非 460 377、329 377 22 羟基豪莫西地那非 505 487、461 487 23 二甲双胍 130 60、85、113 85 24 格列本脲 495 369 369 25 尼群地平 361 329、315 315 26 他达拉非 390 268、262、135 268 27 氨基他达拉非 391 269、262、135 269 28 伐地那非 489 299、377 299 29 那红地那非 453 353、396 353 30 丁二胍 158 60、116、141 60 31 豪莫西地那非 489 461、377、311 461 6 质控试验 每批样品应同时进行空白 实验和加标质控 实验。 全国团体标准信息平台 T/SZTIC 002-2021 4 6.1 空白试验 称取空白 样品，按照 5.2和5.3步骤与样品同法操作。 6.2 加标质控试验 称取 100 mg空白样品于滴瓶 （ 3.4.1） 中， 加入 3 mL提取液 （ 4.6） ， 加入适量标准中间液 （ 100 µ g/m L） （3.3.2），使质 控样待测组分含量与《表 3 31种非法添加化学药物的检出限》中的检出限一致，然后 按照 5.2和5.3步骤与样品同法操作。 7 结果判定 仪器软件将采集得到的目标离子的一级质谱及其二级质谱图呈现，并与内置标准谱图库中的 31种 非法添加化学药物的质谱谱图进行匹配计算，对测试结果进行判定。当仪器判断结果为阳性时，应对测 试结果进行人工复核， 样品谱图中子离子与参考子离子（参照表 1）的相对丰度与标准物质质谱谱图相 对丰度应保持一致，若所有子离子的相对丰度（ I）偏差均不超过表 2规定的范围，则可判定为样品中 存在该成分。 表2 定性复核 时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度（ %） I>50% 50%≥I>20% 20%≥I>10% I≤10% 允许的最大偏差（ %） ± 20 ± 25 ± 30 ± 50 备注： 31种非法添加化学药物标