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ICS 65.020.30 B 44 中华人民共和国国家标准 GB/T14926.54—2001 实验动物 血凝抑制试验 Laboratory animalHaemoglutination inhibition test (HAI) 2001-08-29发布 2002-05-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 GB/T 14926.54—2001 前 言 本标准修订了GB/T14926.24—1994《实验动物 小鼠肺炎病毒检测方法》中的血凝抑制试验方 法,将其作为一个独立标准列出。 本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口。 本标准起草单位:中国实验动物学会。 本标准主要起草人:贺争鸣。 中华人民共和国国家标准 实验动物 血凝抑制试验 GB/T14926.54—2001 Laboratory animal—Haemoglutination inhibition test(HAI) 1范围 本标准规定了血凝抑制试验(HAI)所用试剂、器材和操作步骤等。 本标准适用于实验动物病毒抗体的检测。 2原理 某些病毒在一定的条件下,能够选择性的凝集某些动物红细胞。这种凝集红细胞的能力可被特异 性抗体所抑制。 3主要试剂与器材 3.1试剂 3.1.1血凝素抗原 血凝抗原除部分病毒(如痘类病毒能与感染性颗粒分开外,大部分是与病毒的感染性颗粒相关联, 凡培养于鸡胚或组织培养中的病毒及其抗原物质,经离心除去沉淀,均可用作血凝抑制试验的血凝素抗 原。见GB/T14926.52—2001中表1、表2。 3.1.2红细胞悬液 根据不同病毒血凝所需敏感红细胞制备悬液。一般将血液保存于阿氏溶液内,使用前pH7.4PBS 洗三次,再悬于pH7.4PBS中。 3. 1.3阳性血清 3.1.4阴性血清 3.1.5 PBS(0.01 mol/L,pH7.4) 氯化钠 8g 氯化钾 0.2 g 磷酸二氢钾 0.2 g 磷酸氢二钠(NazHPO4:12H,O) 2.83 g 蒸馏水 加至1000mL 3.1.6阿氏溶液 葡萄糖 2.05g 枸橡酸钠 0.8 g 枸橡酸 0.055 g 氯化钠 0. 42 g 蒸馏水 100 mL 115℃,30min灭菌,保存于4℃。 3.2器材 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2001-08-29批准 2002-05-01实施 1
GB-T 14926.54-2001 实验动物 血凝抑制试验
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