ICS 07.080 Q 8499 团体标 准 T/SZAS 18—2020,T/LTIA 09—2020,T/SAS 0007—2020 严重急性呼吸系统综合征冠状病毒 2 （SARS-CoV-2） 核酸qRT-PCR检测试剂盒质 量评价要求 Requirements of qRT -PCR detection kit of Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2 (SARS -CoV-2) quality evaluation 2020 - 06 - 08发布 2020 - 07 - 08实施 深圳市标准化协会 深圳市生命科技产学研资联盟 上海市标准化协会 发布 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/SZAS 18—2020,T/LTIA 09—2020,T/SAS 0007—2020 I 目 次 前 言 ................................ ................................ ............ II 1 范围 ................................ ................................ ............... 1 2 规范性引用文件 ................................ ................................ ..... 1 3 术语和定义 ................................ ................................ ......... 1 4 缩略语 ................................ ................................ ............. 1 5 质量评价要求 ................................ ................................ ....... 2 6 质量评价指标和方法 ................................ ................................ . 2 7 试剂保存和使用 要求 ................................ ................................ . 5 8 试剂盒标识和说明书要求 ................................ ............................. 6 9 废弃物处理及防止交叉污染的措施 ................................ ..................... 7 10 质量评价报告 ................................ ................................ ...... 7 全国团体标准信息平台 T/SZAS 18—2020,T/LTIA 09—2020,T/SAS 0007—2020 II 前 言 本标准编写格式遵循了 GB/T 1.1 -2009 给出的规则编写。 本标准由 深圳华大因源医药科技有限公司 提出。 本标准由深圳市标准化协会、深圳市生命科技产学研资联盟、上海市标准化协会联合归口。 本标准主要起草单位： 深圳华大因源医药科技有限公司、深圳华大基因股份有限公司、 深圳海关动 植物检验检疫技术中心 、上海国际旅行卫生保健中心 、深圳市标准化协会、深圳市生命科技产学研资联 盟、上海市标准化协会、深圳华大基因科技有限公司、 深圳市药品检验研究院（深圳市医疗器械检测中 心）、北京卓诚惠 生生物科技股份有限公司、江苏宏微特斯医药科技有限公司、江苏奇天基因生物科技 有限公司、北京万泰生物药业股份有限公司、深圳华大智造科技有限公司、深圳华大生命科学研究院。 本标准主要起草人：申奥、宫艳萍、吴红龙、 史卫军、曾少灵、 陆晔、张志强、刘利成、应清界、 叶祥忠、姜华艳、但丹、李陶莎、 王荣昌、周颖、裘文阳、 徐良、刘尧 、林骏、李倩一、吴昊、武庆 超。 本标准属首次发布 。 全国团体标准信息平台 T/SZAS 18—2020,T/LTIA 09—2020,T/SAS 0007—2020 1 严重急性呼吸系统综合征冠状病毒 2（SARS-CoV-2）核酸qRT-PCR 检测试剂盒质量评价要求 1 范围 本标准规定了严重急性呼吸系统综合征冠状病毒 2（SARS -CoV-2）核酸 qRT-PCR检测试剂盒的质 量评价的术语和定义、评价要求、评价指标和评价方法等。 本标准适用于开展严重急性呼吸系统综合征冠状病毒 2（SARS -CoV-2）核酸 qRT-PCR检测试剂盒 的质量评价 。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件， 仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 21415 体外诊断医疗器械 生物样品中量的测量 校准品和控制物质赋值的计量学溯源性 GB/T 37868 -2019 核酸检测试剂盒溯源性技术规范 GB/T 37871 -2019 核酸检测试剂盒质量评价技术规范 GB/T 20469 -2006 临床实验室设计总则 GB 19489 -2008 实验室生物安全通用要求 GB/T 37875 -2019 核酸提取纯化试剂盒质量评价技术规范 《医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则》 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 Ct值 cycle threshold 每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数。 3.2 参考品 reference material 具有一种或多种足够均匀和很好 地确定了的特性， 用以校准测量装置、评价测量方法或给材料复制 的一种材料或物质。 4 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 全国团体标准信息平台 T/SZAS 18—2020,T/LTIA 09—2020,T/SAS 0007—2020 2 qRT-PCR：荧光定量反转录 -聚合酶链反应（ Quantitative Reverse Transcription -Polymerase Chain Reaction） DNA：脱氧核糖核酸（ Deoxyribonucleic Acid ） PCR：聚合酶链式反应（ Polymerase Chain Reaction ） RNA：核糖核酸（ Ribonucleic Acid ） SARS -CoV -2：严重急性呼吸系统综合征冠状病毒 2（Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2） 5 质量评价要求 5.1 环境要求 用于严重急性呼吸系统综合征冠状病毒 2（SARS -CoV -2）核酸 qRT-PCR检测试剂盒质量评价的 实 验室分区应满足《医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则》中的实验室区域设计原则，实验室的检 测环境工作台、储存、通风的设计要求应符合 GB/T 20469 -2006中3.2～3.4的规定。 5.2 试剂、仪器要求 用于严重急性呼吸系统综合征冠状病毒 2（SARS -CoV-2）核酸 qRT-PCR检测试剂盒质量评价 的参 考品应使用标准方法 计量过的 SARS -CoV-2阳性参考品或经其他方法验证过的临床样本， 用于质量评价 的测量仪器，应 使用校准 合格的测量仪器。 6 质量评价指标和方法 6.1 指标 严重急性呼吸系统综合征冠状病毒 2（SARS -CoV -2）核酸 qRT-PCR检测试剂盒 的评价指标包括 RNA 提取纯化、检出限、精密度、特异性、参考品验证 、稳定性、试剂保存和使用要求、试剂盒标识 和说明 书要求、废弃物处理及防止交叉污染的措施等， 如表1所示。 表1 SARS-CoV-2核酸qRT-PCR检测试剂盒质量评价指标和 要求 指标 评估要求 RNA提取纯化 无论检测试剂是否 含有RNA分离/纯化的组分，企业或使用单位都应结合检测试剂的特性，对配 合使用的核酸提取试剂 /方法的提取效率 、提取核酸纯度等 做充分验证，验证指标参照 GB/T 37875中第4条进行评估 。 检出限 对不同浓度病毒载量的样本进行检测，病毒检测浓度 不高于5×102copies/mL。 精密度 批内及批间精密度 应符合变异系数（ CV，%）≤10%。 特异性 交叉反应： 易产生交叉反应的其他病原体核酸的验证情况，以列表的方式表示经过交叉反应验 证的病原体名称、型别、浓度等信息。 交叉反应测试结果应为 无交叉反应。 干扰物质： 1、内源干扰物质 ，评估样本中常见干扰物质对检测结果的影响，如血红蛋白、甘油 三酯、胆红素等，应注明可接受的最高限值 。2、外源干扰物质 ，评估常用抗病毒药物、干扰素 等对检测结果的影响， 干扰物质测试结果应确 定最大