1 T/CAIA 中国分析测试协会标准 T/CAIA/ SHO17 -2021 工业大麻 大麻酚、四氢大麻酚、四氢大 麻酚酸含量测定 高效液相色谱法 Industrial hemp - determination of cannabinol, Δ9 - Tetrahydrocannabinol and tetrahydrocannabinolic acid - high performans liquid chromatography 2021-12-25 发布 2022-02-01 实施 中国分析测试协会发布 全国团体标准信息平台 2 目 次 前言 ................................ ................................ ................................ ................................ ................................ ... II 1 范围 ................................ ................................ ................................ ................................ ................................ ......2 2 规范性引用文件 ................................ ................................ ................................ ................................ ........... 2 3 术语与定义 ................................ ................................ ................................ ................................ ................... 2 4 原理 ................................ ................................ ................................ ................................ ............................... 2 5 试剂和材料 ................................ ................................ ................................ ................................ .......................... 2 6 仪器和设备 ................................ ................................ ................................ ................................ ................... 3 7 分析步骤 ................................ ................................ ................................ ................................ ....................... 3 8 结果计算与表示 ................................ ................................ ................................ ................................ .................. 3 9 精密度 ................................ ................................ ................................ ................................ ........................... 4 10 附录 A ................................ ................................ ................................ ................................ ............................ 6 全国团体标准信息平台 T/CAIA/SHO17-2021 I 前 言 本文件按照 GB/T 1.1 -2020给出的规则起草。 本文件由中国分析测试协会标准化委员会提出并归口。 本文件起草单位：中国标准化研究院、齐齐哈尔大学、福州海关技术中心、中国中医科学院中药 研究所、中国食品药品检定研究院、苏州汇通色谱分离纯化有限公司、华东理工大学、大连依利特分 析仪器有限公司 本文件主要起草人：云振宇 、兰韬、赵明、李军、时志春、王丹、孙立秋、张维冰、初红涛、杨 方、李慧、初侨、王海燕、戈兆松、王丰琳、于聪聪、孙冬梅 全国团体标准信息平台 T/CAIA/SHO17-2021 2 工业大麻 大麻酚、四氢大麻酚、四氢大麻酚酸含量测定 高效液相色谱 法 1 范围 本文件规定了测定工业大麻中大麻酚、四氢大麻酚、四氢大麻酚酸分析方法的原理、仪器与试剂材料、 分析步骤、仪器测定条件、 结果计算与表示 、数据精密度。 本文件适用于工业大麻中大麻酚、四氢大麻酚、四氢大麻酚酸含量的测定，定量测定范围为： 0.2 mg/g ~ 10 mg/g。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中注日期的引用文件，仅 该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 6379.2 测量方法与结果的准确度 （正确度与精密度） 第2部分：确定标准测量方法重复性与再现 性的基本方法 GB/T 2 6792 高效液相色谱仪 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 工业大麻 Industrial hemp 植株群体花期顶部叶片及花穗干物质中的四氢大麻酚（ THC）质量分数 <0.3%，不能直接作为毒品利 用的一类大麻作物品种。 4 原理 工业大麻样品烘干、粉碎、研磨、过筛后，经 95% 乙醇溶液提取，微孔滤膜过滤，反相色谱分离，紫 外检测器检测，采用外标法定量。 5 试剂和材料 除另外有规定外，所用试剂均为分析纯。 5.1 甲醇（ CH 3OH）：色谱纯。 5.2 乙腈（ C2H3N）：色谱纯。 5.3 乙醇（ C2H5OH）：色谱纯。 5.4 磷酸（ H3PO 4）：纯度 ≥85%。 全国团体标准信息平台 T/CAIA/SHO17-2021 3 5.5 大麻酚（ CBN）标准品（ C21H26O2）： CAS：521-35-7，纯度 ≥ 98%。 5.6 四氢大麻酚（ THC）标准品（ C21H30O2）： CAS：1972 -08-3，纯度 ≥ 98%。 5.7 四氢大麻酚酸（ THCA）标准品（ C22H30O4）： CAS：23978 -85-0，纯度 ≥ 98%。 5.8 磷酸二氢钾（ KH 2PO 4）：分析纯。 5.9 95%乙醇溶液：准确移取 950 mL无水乙醇（ 5.3）于 1 L容量瓶（ 6.9）中，以水定容至刻度线，混匀。 5.10 流动相 A（pH = 4磷酸盐缓冲液）：准确称取 1.640g磷酸二氢钾（ 5.8）于 1 L容量瓶（ 6.9），加入 900 mL水，用磷酸（ 5.4）调整 pH为4，再以水定容，使用前经滤膜（ 6.7）抽滤。 5.11 流动相 B（0.1%磷酸乙腈溶液）：准确移取 1 mL磷酸（ 5.4）于 1 L容量瓶（ 6.9），以乙腈定容， 使用前经有机相滤膜（ 6.8）抽滤，超声（ 6.2）脱气。 5.12 混合标准储备溶液（ 40 μg/mL ）：准确移取 1 mg/mL CBN 标准品（ 5.5）、 1 mg/mL THC 标准品 （5.6）、 1 mg/mL THCA 标准品（ 5.7）各 1 mL，置于25 mL容量瓶（ 6.9）中，用甲醇（ 5.1）溶解并定容， 标准储备溶液避光保存于 4℃冰箱备用，有效期 3个月。 6 仪器和设备 6.1 涡旋振荡器 ； 6.2 超声波清洗器，功率不低于 250 W，或相当的设备 ； 6.3 离心机，不低于 400