ICS：71.100.70 Y40 团 体 标 准 T/HPCIA006-2022 代替T/HPCIA006-2021 化妆品温和刺激性的测定斑马鱼胚法 Cosmetics-Mildirritation-Zebrafish(Daniorerio)embryoassay 2022年05月05日发布 2022年05月05日实施 广州开发区黄埔化妆品产业协会发布 全国团体标准信息平台 目录 前言......................................................................................................................................................................3 1范围......................................................................................................................................................................4 2术语和定义..........................................................................................................................................................4 3规范性引用文件.................................................................................................................................................4 4方法原理..............................................................................................................................................................4 5生物模型..............................................................................................................................................................4 6材料试剂..............................................................................................................................................................5 7仪器设备..............................................................................................................................................................5 8实验过程..............................................................................................................................................................5 9结果计算..............................................................................................................................................................6 10质量控制.............................................................................................................................................................6 11废弃物处置.........................................................................................................................................................7 附录A（资料性附录）胚胎正常发育参考图.....................................................................................................8 附录B（资料性附录）产卵盒参考示意图.........................................................................................................9 附录C（资料性附录）判定标准参考图...........................................................................................................10 附录D（资料性附录）化妆品及原料前处理参考方法...................................................................................11 附录E（资料性附录）斑马鱼养鱼及维护........................................................................................................12 全国团体标准信息平台 前言 本标准是GB/T1.1-2020给出规则起草。 本标准代替T/HPCIA006-2021《化妆品温和刺激性的测定斑马鱼胚法》。 本标准与T/HPCIA006-2021相比，除编辑性修改外主要技术变化如下： ——增加了刺激性和无可观察效应浓度两个术语和定义； ——修改了实验的方法原理； ——修改了胚胎缓冲水的配置方法； ——修改了阳性对照组的储备溶液浓度； ——增加了预试验的实验方法； ——增加了视频录像的实验要求； ——修改了结果计算的要求； ——修改了结果判定的测试终点和评价指标； ——修改了质量控制的空白对照试验和阳性对照； ——增加了质量控制的溶剂对照； ——修改附录D（资料性附录）化妆品及原料前处理参考方法。 本标准由广州开发区黄埔化妆品产业协会提出。 本标准由广州开发区黄埔化妆品产业协会归口。 本标准起草单位：澳思美日用化工（广州）有限公司、广州睿森生物科技有限公司、广东袋鼠妈妈 生物科技有限公司、润本生物技术股份有限公司、广州市暨优生物科技有限公司、广州奥蓓斯化妆品有 限公司、广州市络捷生物科技有限公司、广州易和生物科技有限公司、广州鲁比生物科技有限公司、广 州度普化妆品科学研究院、皓雨（广州）化妆品制造有限公司、广东省保化检测中心有限公司、广州保 化斑马鱼检测技术有限公司、广东药科大学、广东省人民医院、暨南大学化妆品与美容科学研究院。 本标准主要起草人：郑伟东、梅文杰、肖德凯、黄伟雄、谢水林、孙永、王俊林、何斌、王芬、黄 裕、罗欣茹、潘武、杨涛、黄晓婷、刘宁芝、袁婵龄、邹俊、黄裕、赵海山、陈小佳、王雅馨、何露露、 何铭杰。 本标准所代替标准历次发布情况为： ——T/HPCIA006-2021。 全国团体标准信息平台 化妆品温和刺激性的测定斑马鱼胚法 1范围 本标准规定了评价化妆品温和刺激性的斑马鱼胚实验的方法原理及操作。 本标准适用于化妆品（膏霜、乳液、凝胶、精华等）及化妆品原料的温和刺激性评价。 2术语和定义 2.1.hpf 受精后小时数的英文缩写，即“hourspost-fertilization”。 2.2.累计死亡率Cumulativemortalityrate 累计死亡胚胎数占胚胎总数的比率。 2.3.摆动次数 斑马鱼卵黄囊位置的移动的次数，即为摆动次数。 2.4.刺激性 皮肤刺激性主要表现为皮肤的疼痛或瘙痒。在24hpf（Prim-5stage）时期，斑马鱼胚胎运动神经已 发育，但尚未有自主运动产生，此时外界的疼痛或瘙痒刺激会使胚胎出现行为学变化。 2.5.无可观察效应浓度 与对照相比，对试验生物未产生显著效应的最高受试物浓度，即“noobservedeffectconcentration; NOEC”。 3规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注明日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件，凡不注明日期的引用文件，其最新版本（